文章目录

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.2 GsSAMS基因的植物超量表达载体构建

1.3 GsSAMS对水稻的遗传转化

1.4 抗性植株分子生物学检测

1.5 水稻幼苗期耐盐碱性分析

1.6 盐碱胁迫下抗氧化酶活性测定

1.7 盐碱胁迫相关基因表达水平检测

2 结果与分析

2.1 GsSAMS基因植物超量表达载体构建

2.2 水稻遗传转化及抗性植株分子生物学检测

2.3 GsSAMS转基因水稻耐盐碱性分析

2.4 GsSAMS转基因水稻抗氧化物酶活性分析

2.5 GsSAMS转基因水稻盐碱胁迫相关基因表达分析

3 讨论

4 结论

文章摘要:S-腺苷甲硫氨酸合成酶（SAMS）是生化反应中合成甲基供体的关键酶,在植物逆境响应中具有重要的作用。为了鉴定野生大豆S-腺苷甲硫氨酸合成酶GsSAMS基因对水稻盐碱胁迫耐性的影响,本研究采用USER克隆技术构建植物过表达载体,以农杆菌介导法侵染水稻愈伤组织,经过PCR、半定量PCR（RT-PCR）等分子检测获得GsSAMS转基因水稻株系;通过对比野生型和转基因水稻盐碱胁迫处理后的表型、存活率及过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）活性等指标,发现GsSAMS转基因株系耐盐碱性显著优于野生型。通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）分析发现盐碱胁迫处理后,OsM6PR1、OsNAC5、OsPOX1基因在转基因株系中的表达显著高于野生型,说明GsSAMS可通过提高抗氧化物酶POD和CAT活性及相关基因的表达,增强转基因水稻盐碱胁迫耐受性。本研究获得的耐盐碱水稻新株系对盐碱地的开发利用具有重要意义。

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