例小儿重症肺炎病原学分析
小儿重症肺炎是儿科临床的常见病及多发病,也是小儿死亡的重要原因之一,我国每年约有648万肺炎患儿,其中约有10%属于小儿重症肺炎,共死亡率可达5.7%[1]。小儿重症肺炎不但使患儿承受着生理痛苦,也给患儿家庭带来了沉重的经济负担,成为一个亟待解决的问题。小儿重症肺炎的病原体种类很多,有细菌、病毒及肺炎支原体等,研究表明小儿重症肺炎的病原不仅跟患儿的年龄和季节有关,还存在地区间的差异[2],明确病原体类型对于临床治疗和改善小儿重症肺炎患儿的预后有着十分重要的意义[3]。本研究收集2016年9月-2017年9月某院收治的198例小儿重症肺炎患儿的痰、肺泡灌洗液及血清样本,检测病原菌以期了解小儿重症肺炎的病原学分布特点,现报告如下。
1资料与方法
1.1一般资料
选取2016年9月-2017年9月收治的198例小儿重症肺炎患儿作为研究对象,100例收集痰和血清标本,98例收集痰、肺泡灌洗液及血清标本。所有患儿符合文献[4]对小儿重症肺炎的诊断标准:在社区获得性肺炎的基础上存在以下任何1项,拒食或脱水症、意识障碍、呼吸频率明显增快(婴幼儿≥70次/min、年长儿≥50次/min,除外发热或哭吵等因素)、发绀及呼吸困难,影像学检查提示多肺叶受累或病变浸润范围多2/3肺野、存在胸膜腔积液、未吸氧时脉搏血氧饱和度<92%,存在肺外并发症;排除异物、支气管哮喘、过敏性非感染性肺炎、结核感染及寄生虫感染等呼吸道疾病,排除存在免疫功能缺陷、或长期使用糖皮质激素或免疫抑制剂者,排除院内获得性肺炎或各种全身疾病引起的肺疾病患儿。198例患儿中,男95例、女103例,年龄1个月~15岁、平均(3.)岁。
1.2方法
1.2.1标本采集 患儿于入院24 h内,采用一次性无菌吸痰管,无菌操作吸取鼻咽分泌物1~2 mL移入无菌生理盐水试管中,或经支气管镜取支气管肺泡灌洗液,机械通气患儿从气管导管负压吸取痰液置于无菌试管中,30 min内送检,均为合格样本(鳞状上皮细胞<10个/低倍视野,白细胞>10~25个/低倍视野);采集静脉血2 mL储存于2 ℃冰箱中,用于肺炎支原体、或肺炎衣原体血清抗体检测。
1.2.2标本处理 将采集的痰和肺泡灌洗液接种至哥伦比亚血平板、中国蓝琼脂平板,放置35 ℃培养箱中培养18~24 h,分离纯化培养出得菌落,采用法国生物梅里埃公司VITEK-Copact全自动细菌、真菌分析仪进行鉴定及药敏试验。采用免疫荧光检测所有样本中呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、流感病毒 A 型(IFV-A)、流感病毒 B 型(IFV-B)、副流感病毒Ⅰ型(HPIV-Ⅰ)、副流感病毒Ⅱ型(HPIV-Ⅱ)、副流感病毒Ⅲ型(HPIV-Ⅲ )等7种呼吸道病毒,试剂盒购自上海贝西生物科技有限公司。采用实时定量PCR(qPCR)法检测所有样本中支原体(MP)和衣原体(CP)基因,拷贝数≥5×102提示有感染,试剂盒采购于中山大学达安基因股份有限公司。采用被动凝集法检测样本中肺炎支原体和肺炎衣原体IgM≥1 ∶160,提示有感染,试剂盒采购于富士瑞必欧株式会社。
1.3观察指标
(1)分析198例小儿重症肺炎患儿感染病原体的总体分布;(2)将患儿分为<1岁组、1~3岁组、3~7岁组及7~15岁组,分析各组患儿感染病原体的分布情况;(3)分析患儿在不同季节(春、夏、秋及冬)感染病原体的分布情况。
1.4统计学方法
使用SPSS 22.0统计软件进行数据分析,计量资料以均数±标准差表示,两两比较采用t检验,计数资料以率(%)表示,数据比较采用进行χ2检验,P<0.05表示差异有统计学意义。
2结果
2.1感染病原体分布
198例患儿中,病原体检测阳性者169例,阳性率为85.35%;占比较高的感染类型分别为单纯细菌感染、混合感染及单纯病毒感染,混合感染中以细菌合并支原体和细菌事并病毒为主;主要感染的革兰阴性菌有肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌,主要感染的革兰阳性菌有肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌,主要感染的病毒有RSV、ADV。见表1。
表1 169例小儿重症肺炎患儿感染病原体分布Tab.1 The distribution of infection types in 169 children with severe pneumonia感染类型n分类占比/%总占比/%单纯细菌.00(59/59) 34.91(59/169) 肺炎克雷伯菌1118.64(11/59)6.51(11/169) 大肠埃希菌915.25(9/59)5.33(9/169) 鲍曼不动杆菌610.17(6/59)3.55(6/169) 铜绿假单胞菌46.78(4/59)2.37(4/169) 嗜麦芽窄食单胞菌35.08(5/59)1.78(3/169) 流感嗜血杆菌23.39(2/59)1.18(2/169) 阴沟肠杆菌11.69(1/59)0.59(1/169) 产气肠杆菌11.69(1/59)0.59(1/169) 卡他莫拉菌11.69(1/59)0.59(1/169) 肺炎链球菌1322.03(13/59)7.69(13/169) 金黄色葡萄球菌711.86(7/59)4.14(7/169) 表皮葡萄球菌11.69(1/59)0.59(1/169)单纯病毒.00(42/42)24.85(42/169) (20/42)11.83(20/169) (12/42)7.10(12/169) (5/42)2.96(5/169) (2/42)1.18(2/169) HPIV-Ⅰ24.76(2/42)1.18(2/169) HPIV-Ⅱ12.38(1/42)0.59(1/169) HPIV-Ⅲ00.00(0/42)0.00(0/169)单纯真菌7100.00(7/7)4.14(7/169) 白假丝酵母菌571.43(5/7)2.96(5/169) 中间假丝酵母菌228.57(2/7)1.18(2/169)非典型病原体.00(14/14)8.28(14/169) 单纯肺炎支原体1071.43(10/14)4.73(10/169) 单纯肺炎衣原体428.57(4/14)3.55(4/169)混合感染.00(47/47)27.81(47/169) 细菌+支原体1634.04(16/47)9.47(16/169) 细菌+病毒1225.53(12/42)7.10(12/169) 病毒+支原体919.15(9/42)5.33(9/169) 病毒+病毒510.64(5/42)2.96(5/169) 细菌+病毒+支原体48.51(4/42)2.37(4/169)
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